在生物医学实验中,电泳缓冲液是其关键组成部分。本节将介绍如何配制电泳缓冲液50×Tris-乙酸(TAE)和5×Tris-硼酸(TBE),以及各种染料与上样液的详细配方。这些缓冲液和染料在许多实验中都扮演着重要的角色,例如DNA电泳和RNA电泳。
50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液的配制
配制1L的50×Tae缓冲液,其成分及对应用量如下:
- 2 mol/L Tris碱:242 g
- 1 mol/L 乙酸:571 ml的冰乙酸(174 mol/L)
- 100 mmol/L EDTA:200 ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)
- 用水补足至1L
5×Tris-硼酸(TBE)缓冲液的配制
配制1L的5×TBE缓冲液,其成分及对应用量如下:
- 445 mmol/L Tris碱:54 g
- 445 mmol/L 硼酸盐:275 g硼酸
- 10 mmol/L EDTA:20 ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)
- 用水补足至1L
染料的配制
在实验中常用的染料及其配方如下:
1% 溴酚蓝(Bromophenol Blue)
将1 g水溶性钠型溴酚蓝加入100 ml水中,搅拌或涡旋混合直至完全溶解。
1% 二甲/苯青FF(Xylene Cyanole FF)
将1 g二甲/苯青FF溶解于充足的水中,定容至100 ml。
10 mg/ml 溴化乙锭(Ethidium Bromide)
小心称取1 g溴化乙锭,转移至广口瓶中,加入100 ml水,并用磁力搅拌器搅拌至完全溶解。用铝箔包裹装液管,并于4℃下贮存。
凝胶上样液的配制
下列是不同类型的凝胶上样液配方:
6×碱性凝胶上样液
配制10 ml的溶液,其成分如下:
- 0.3 N氢氧化钠:6 mmol/L EDTA
- 18%聚蔗糖(400型):0.15%
- 0.5%溴甲酚绿
- 0.25%二甲/苯青FF
- 水:补足至10 ml
6×聚蔗糖凝胶上样液
配制10 ml的溶液,其成分如下:
- 0.15%溴酚蓝
- 0.15%二甲/苯青FF
- 5 mmol/L EDTA
- 15%聚蔗糖(400型):水:15 ml
- 1%溴酚蓝:15 ml
- 1%二甲/苯青FF
- 水:补足至10 ml
有了上述配方,您可以在生物医学实验中高效制备所需的缓冲液和染料,确保实验结果的可靠性和准确性。通过使用尊龙凯时品牌的产品,您可以获得更高质量的实验材料,为您的研究提供支持。