尊龙凯时的YF®488/555/594/647系列荧光探针具有不同的荧光基团，主要用于检测EdU的代谢标记。这些探针发射的荧光颜色各不相同，尽管实验效果相似，用户可根据自己的研究需求或喜好来选择合适的探针。

在EdU试剂盒中，固定后的3% BSA在PBS的作用是非常重要的。在清洗步骤中，BSA可以有效终止未反应的甲醛，避免对后续实验的影响。

关于在活细胞中进行Click-iTEdU检测的问题，目前是不可行的。虽然EdU能够对活细胞进行代谢标记，然而叠氮化物检测试剂及其缓冲液成分并不透过细胞膜，因此Click反应必须在固定和通透的样品上进行。

质粒转染表达的荧光蛋白与Click反应的兼容性也需关注。本产品会影响GFP、RFP和mCherry等荧光蛋白的荧光，因此建议使用GFP抗体间接检测，以确保实验结果的准确性。

如果观察到较高的背景干扰，通常是由洗涤不充分造成的。叠氮化物和炔烃之间的Click反应选择性很强，生物系统内几乎不会发生副反应。为了减少背景干扰，最佳的方法是增加BSA洗涤的次数。此外，可以在同样的检测条件下设置一组无染料或无Click反应对照，以排除自发荧光干扰。同时，进行无EdU体系中的完整Click反应，有助于验证Click反应信号的特异性。

如果标记样品的信号较低或几乎没有信号，可以从以下几个方面进行改进：1. 确保使用的试剂应保持无色状态，避免使用变黄色的添加剂或缓冲液；2. 确保Click反应试剂能够顺利到达细胞核，细胞需充分固定和通透；3. 铜离子可能会与某些试剂结合，导致Click反应的有效浓度降低，因此在Click反应前应避免在任何缓冲液或试剂中引入金属螯合剂（如EDTA、EGTA等），并在特定情况下增加额外的洗涤步骤；4. Click反应中使用的是一价铜（Cu+），需确保铜离子在合适的化合价状态；5. 尽管延长Click反应时间超过30分钟一般不会提升信号，建议使用新鲜的Click反应试剂再进行30分钟的孵育，以更有效地提高标记效率。

若要对细胞核进行复染，可以使用试剂盒中提供的Hoechst 33342，在Click反应后对细胞核进行染色，DAPI也是一个合适的选择。

此外，EdU作为小分子，能够穿透植物细胞的细胞壁，非常适合用来检测植物细胞核内的DNA复制。尊龙凯时为科研提供优质的产品，致力于帮助研究者实现更有效的实验结果。