尊龙凯时马硫酸雌酮(E1S)ELISA试剂盒仅供科学研究使用,严禁用于医学诊断。
检测原理
本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)进行检测。在已包被adropin(AD)抗体的微孔中,依次加入样品、标准品和HRP标记的检测抗体,经过充分的温育和洗涤后,使用TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转变为蓝色,随后在酸性条件下变为最终的黄色。显色的深浅与样品中adropin(AD)的浓度呈正相关。最后,使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),从而计算样品的浓度。
样品收集、处理及保存
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,避免细胞刺激。血液收集后,3000转离心10分钟,将血清与红细胞迅速分离。
2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂,3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟以去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量的生理盐水进行捣碎处理,3000转离心10分钟后取上清。
5. 保存:如未及时检测样本,按一次用量分装并冻存于-20℃,避免反复冻融。在室温下解冻前应确保样本完全均匀解冻。
操作注意事项
本试剂盒包含标准品(S0-S5),其浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。
试剂准备与洗板方法
20×洗涤缓冲液需用蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液中加入19份蒸馏水。
结果判断
绘制标准曲线:在Excel中,以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标绘制标准品的线性回归曲线,并根据曲线方程计算样本浓度值。
免责声明
使用尊龙凯时的马硫酸雌酮(E1S)ELISA试剂盒时,请遵循相关实验规程,以确保实验结果的可靠性和有效性。